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Transgenic Facility

FOSSO DI FIORANO

Il Servizio Animali Transgenici è attivo presso il CNR dal 1999 e si incentra sulla generazione di topi geneticamente modificati (transgenici, knockout, knockin) con l'applicazione e lo sviluppo delle relative tecniche standard e una particolare attenzione alle nuove metodologie di modificazione genica (Zinc Finger Nucleases (ZFN), Transcription activator-like effector nucleases (TALEN), Clustered regulatory interspaced short palindromic repeat (CRISPR/Cas-based RNA-guided DNA endonucleases).Il servizio è offerto su base collaborativa e fornisce anche assistenza e consulenza su progetti e strategie sperimentali che prevedano l’uso e/o la generazione di modelli animali.

Le attività del servizio comprendono:

  • purificazione di costrutti di DNA transgenico;

  • realizzazione di modelli murini transgenici mediante microiniezione dei costrutti nel pronucleo di embrioni allo stadio di zigote e realizzazione di modelli knockout (KO) o knockin (KI) mediante iniezione di cellule staminali embrionali mutagenizzate in blastocisti;

  • microchirurgia (vasectomie, trasferimento di embrioni in utero);

  • prelievo, fissazione e colorazioni specifiche su embrioni murini a vari stadi di sviluppo;

  • isolamento e coltura di cellule staminali embrionali (ES) e fibroblasti primari da embrioni;

  • genotipizzazione di topi mutanti mediante PCR;

  • gestione di colonie di topi mutanti (accoppiamenti, svezzamenti, backcrossing, riderivazione); criopreservazione di linee di topi mutanti mediante congelamento di embrioni a due cellule, gameti, ovaie. Fertilizzazione in vitro e trapianto di ovaie;

  • prelievi di tessuti e di sangue per analisi biochimiche, istologiche e sierologiche;

  • trattamenti ormonali, farmacologici e di terapia genica sui topi.

Attività didattica:

Il Servizio ha organizzato un corso teorico-pratico nell’ambito della Formazione del Personale CNR “Fase a Regime”:  Corso "Metodologie di riderivazione di linee murine" e collabora in qualità di personale docente alle lezioni teoriche e alle esercitazioni pratiche sugli animali geneticamente modificati nell’ambito del corso annuale: "Scienza degli Animali da Laboratorio" accreditato dalla Federation of European Laboratory Animal Science Associations (FELASA, Cat B, No: 023/09)

Contatti:

  • Elisabetta Mattei (Primo Tecnologo)
    Tel. +39 06 501703232/3021
    e-mail: Questo indirizzo email è protetto dagli spambots. È necessario abilitare JavaScript per vederlo.

  • Georgios Strimpakos (Tecnologo)
    Tel. +39 06 501703232/3021
    e-mail: Questo indirizzo email è protetto dagli spambots. È necessario abilitare JavaScript per vederlo.